Wie wird Granatapfelschalen-Tannin extrahiert?

Tannine, auch Tannine genannt, sind wasserlösliche Polyphenole, die in Pflanzen vorkommen. In den letzten Jahren wurde zunehmend Tannin aus Punica Granatum L gewonnen. Aufgrund der leichten Rohstoffverfügbarkeit schreibt das Chinesische Arzneibuch seit 10 vor, dass der Tanningehalt in Granatapfelschalen 1995 % nicht unterschreiten sollte. Granatapfelschalen-Tannin hat Es wurde nachgewiesen, dass es signifikante antioxidative und freie Radikale abfangende Wirkungen hat, die die Oxidation von LDL-Cholesterin hemmen, Arteriosklerose verhindern, die Aktivität von Angiotensin-umwandelnden Enzymen hemmen, den Blutdruck und die Lipide senken und die Proliferation von Krebszellen wie Brustkrebs und Prostatakrebs hemmen können und Mundkrebs und schützt die Magenschleimhaut. Es ist weit verbreitet in Lebensmitteln, Medizin und Kosmetik. In diesem Artikel werden verschiedene Extraktionsmethoden für Granatapfelschalen vorgestellt Tannine eingeführt werden.

• Rohstoffe: getrocknete Granatapfelschale;
• Instrument: Unruh; Wärme sammelnder Magnetrührer mit konstanter Temperatur; Ultraschall-Reinigungsinstrument; Mikrowelle; Zentrifuge; Scannen von elektronischen Displays; Mikrospiegel.
• Reagenz: Analysenreines Reagenz; Pektinase, Cellulase

Extraktionsmethoden von Tannin aus Granatapfelschalen

(1) Wasserrückflussmethode

015 g Granatapfelschalenpulver genau wiegen, 10 ml 50%ige Acetonlösung zugeben, Rückflussextraktion zweimal bei 60 ℃ für jeweils 1 h, Zentrifuge 4 500 U/min für 30 min, die obere klare Flüssigkeit wurde ausgegossen und vereinigt, und die Volumen wurde gemessen.

(2) Ultraschall-Extraktionsverfahren

Wiegen Sie genau 015 g Granatapfelschalenpulver, fügen Sie 10 ml 50%ige Acetonlösung hinzu, Ultraschallextraktion zweimal bei 60 ° C, jeweils 30 Minuten, der nachfolgende Vorgang war derselbe wie bei Methode (1).

(3) Mikrowellen-Extraktionsmethode:

Die Mikrowellenerwärmung kann die Vakuolenzellen aufgrund des schnellen Temperaturanstiegs augenblicklich anschwellen und brechen lassen, so dass die intrazellulären Substanzen freigesetzt werden, besonders geeignet für die Extraktion intrazellulärer Substanzen in Pflanzenzellen. Verfahren: Wiegen Sie genau 10 g Granatapfelschalenpulver, fügen Sie 10 ml 10 % Acetonlösung hinzu, Mikrowellenextraktion für 3 Mal, jeweils 10 Minuten, und befolgen Sie das gleiche Verfahren wie (1).

(4) Enzymatische Extraktion

Genaues Wiegen von 015 g Granatapfelschalenpulver, Zugabe von 10 ml Citratpufferlösung mit pH 415, Zugabe von 0105 g Pektinase und 0105 g Cellulase, Rückflussextraktion bei 50 °C für 2 Mal, jedes Mal für 1 Stunde, die folgenden Operationen wie (1).

(5) Semibionisches Verfahren:

Die semibionische Extraktionsmethode (kurz SBE-Methode) ist ein neues Verfahren, das für die Verabreichung der traditionellen chinesischen Medizin an den Verdauungstrakt entwickelt wurde, indem die Methode der gesamten Arzneimittelstudie und die Methode der molekularen Arzneimittelstudie kombiniert werden, wodurch die Prinzipien der oralen Verabreichung und des Arzneimitteltransports durch den Magen-Darm-Trakt simuliert werden Trakt. Das Material wird zuerst mit saurem Wasser mit einem bestimmten pH-Wert, dann mit alkalischem Wasser mit einem bestimmten pH-Wert extrahiert, und die Extraktionslösung wird filtriert und konzentriert.

Der Prozess: 0.15 g Granatapfelschalenpulver wurden genau abgewogen und jeweils 10 ml HCl-Lösung (pH 210), Citrat-Natriumcitrat-Pufferlösung (pH 715) und Natriumbicarbonat-Natriumhydroxid-Pufferlösung (pH 813) verwendet Rückflussextraktion für 1 h bei 60 ℃. Die folgenden Operationen waren wie folgt: (1).

(6) Doppelschnecken-Extrusionsverfahren:

Beim Doppelschnecken-Extrusionsverfahren wird das Material durch die Förderanlage zur Temperiervorrichtung geschickt, das Material in der Temperiervorrichtung durch Dampftemperieren bei hoher Temperatur, durch die Spülnut in den Expansionsmechanismus, in einem Paar parallelmaschiger Schneckenpumpen, von eine bestimmte Form des Düsenlochs sofortiges Extrusionsschneiden in Granulat. Die Extrusionstemperatur beträgt bis zu 100 ~ 200 ℃, was Tannine in Granatapfelschalen abbauen und zerstören kann. Die Extraktionsrate war 2 % höher als die von Ultraschallwellen, selbst wenn die Faser der Granatapfelhaut-Zellwand durch Aufweiten gelockert wurde.

Das zerstoßene Granatapfelschalenpulver wurde mit einem Doppelschneckenextruder zu einem langen Streifen mit einem Durchmesser von etwa 5 mm extrudiert, auf 015 g abgewogen und gemäß dem in (2) beschriebenen Verfahren extrahiert.

Bestimmung

Der Extrakt wurde mit 50 % Aceton auf 20 ml versetzt und in einem Wasserbad von 35 ± 2 °C auf etwa 35 °C erhitzt. 1 ml Zinkacetatlösung mit einer Konzentration von 1 mol/ l aufnehmen und in einen Erlenmeyerkolben geben, 017 ml gesättigtes Ammoniak zugeben, gut schütteln, um den weißen Niederschlag aufzulösen, und mit obiger Extraktionslösung mischen, in das Original geben 30 1 ml NH1125Cl-NH4 · H3O-Puffer mit pH 2 zugeben, 10 ml Chromschwarz-T-Indikator und 0105 mL destilliertem Wasser, und dann mit 15mol/L Ethylendiamintetraessigsäure Dinatrium (EDTA-0105Na) Standardlösung titrieren, die Lösung von Rot nach Blau ist der Endpunkt.

Tannin-Extraktionsrate/(%) = 011556 × V/ W × 100 %

Darunter ist 011556 die experimentell ermittelte Proportionalitätskonstante; W ist die Probenmasse g; V ist der Komplexbildungsverbrauch von 1 mol/L Zinkacetat-Standardlösung, ml.

Die Ergebnisse

Wie aus der nachstehenden Tabelle ersichtlich ist, erzielte die semi-bionische Extraktionsmethode die höchste Tannineffizienz, gefolgt von der Mikrowellen-Extraktionsmethode. Die Geschwindigkeit der enzymatischen Extraktion war am niedrigsten. Dies liegt hauptsächlich daran, dass Tannine an Proteine ​​​​binden können und Enzyme eine Art Protein sind. Die Gerbsäure in der Flüssigkeit verbindet sich mit Protein zu einem in der Flüssigkeit unlöslichen Niederschlag, wodurch die Bestimmung des Gerbsäuregehalts sehr gering ist. Daher ist die enzymatische Extraktion für die Tanninextraktion nicht geeignet.

Tabelle: Tannin-Extraktionsrate aus verschiedenen Methoden

Methoden extrahieren	(1)	(2)	(3)	(4)	(4)	(5)
Rate / %	25.0	27.9	37.4	13.1	43.2	30.3

Gerbsäure ist einer der Hauptbestandteile der Granatapfelschale und macht etwa 30 % der Masse der Granatapfelschale aus. Es hat starke antioxidative, antibakterielle, antivirale und Antitumorwirkungen auf den Körper, einschließlich Tiere und Menschen, sowie auf das Verdauungssystem und das Fortpflanzungssystem, und hat sich in den letzten Jahren zu einem Forschungsschwerpunkt entwickelt. Die Ergebnisse zeigen, dass das semibionische Verfahren und das Mikrowellenverfahren gute Auswirkungen auf die Extraktion von Tannin aus Granatapfelschalen haben. Darüber hinaus kann die Extraktionsrate von Tannin stark verbessert werden, indem die Größe der Granatapfelschale entsprechend verringert wird.